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                你知道什么是轉染試劑么?一起來看看吧

                發表時間:2022-07-04  |  點擊率:643
                  轉染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。DNA轉染技術的發展對現代分子生物學產生了巨大的影響。
                 
                  基因轉染技術不僅是研究轉基因和基因表達的重要工具,而且是目前基因治療的關鍵步驟。理想的基因轉染試劑應該具有如下特點:高效轉染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、經濟。
                 
                  哺乳動物的轉染技術在60年代末70年代初即已引入。
                 
                  目前,將外源DNA 導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類,即生物方法和物理化學方法。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、顯微注射、電穿孔、脂質體介導的轉染,以及最近出現的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術。
                 
                  生物方法則主要是以病毒作為載體,通過病毒感染的方式將外源DNA 導入到細胞中, 其中以逆轉錄病毒及腺病毒轉染系統尤為常用。
                 
                  其中病毒載體的特點是整和效率高, 可使外源基因在宿主細胞中長期表達,缺點是存在潛在的安全危險性。電穿孔法及顯微注射法的特點是轉染率較高,缺點是需要昂貴的儀器,前者對細胞的損傷較大,后者在導入DNA 時需要一個細胞一個細胞地注射,不適合大量細胞研究的需要。
                 
                  磷酸鈣在良好的轉染條件下,可以在293T等細胞的轉染達到較高的轉染效率。但磷酸鈣轉染有一個突出的問題,非常不穩定,尤其受PH值的影響非常大,在實驗中使用的每種試劑都必須小心校準,保證質量,因為甚至偏離*條件十分之一個PH都可能導致磷酸鈣轉染的失敗,經常即使最熟練的轉染實驗者也不能保證磷酸鈣轉染的成功,他們可能經常為莫名其妙的轉染失敗而沮喪。
                 
                  同時,他們還經常發現,往往小體積的轉染比如6孔板以下的轉染效果比較理想,可一換到大皿,經常轉染效率下降很快。磷酸鈣的先天缺陷往往是實驗梗阻的主要原因。

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